In het Meerjarenbeleidsplan worden twee belangrijke doelstellingen genoemd. De gemeente streeft ernaar dat meer dan de huidige 37% van de Amsterdamse verplaatsingen op de fiets zullen worden gedaan, maar wil dit niveau in elk geval handhaven. Vooral de Amsterdamse jeugd fietst steeds minder, aldus de gemeente, onder andere als gevolg van gratis openbaar vervoer, zoals de OV-jaarkaart. Daarnaast streeft Amsterdam ernaar om in 2010 hoger te scoren op tevredenheid over Amsterdam als fietsstad. In dat jaar moeten de fietsers Amsterdam een 7,5 geven. In het Tevredenheidsonderzoek onder fietsers in 2006 was dat een 7,0. 

Drie nieuwe routes
Amsterdam wil het Hoofdnet Fiets verbeteren door belangrijke onderdelen van drie routes aan te leggen die nu nog ontbreken. Het gaat om een route voor langzaam verkeer met een brug over het Noordhollandsch Kanaal in het stadsdeel Amsterdam-Noord, een passage voor langzaam verkeer door het Centraal Station en een fietsbrug over de Singelgracht in het verlengde van de Leidsegracht. Daarnaast wil Amsterdam fietspaden aanleggen langs drukke wegen en bestaande fietspaden goed onderhouden. De gemeente wil ook gaan experimenteren met automatische detectie voor fietsers bij verkeerslichten en meer wachttijdvoorspellers installeren.
De gemeente wil verder vijf nieuwe bewaakte fietsenstallingen (Lockers) realiseren bij locaties die veel publiek trekken, zoals het Leidseplein, en bij OV-knooppunten. Daarnaast zal er ook geëxperimenteerd worden met innovatieve oplossingen voor fietsparkeren. Voorbeelden hiervan zijn een automatische stalling (zoals die in Noord bij de pont) en fietsenrekken met ICT-toepassing.Ook wil de gemeente samen met de stadsdelen een pilot uitvoeren voor fietstrommels bij woningen. In deze trommels kunnen bewoners tussen de vijf en tien fietsen stallen. 

Fietsendiefstal
Onder andere door goede stallingen moet het aantal fietsdiefstallen eind 2010 met 40% ten opzichte van 2005 zijn afgenomen (het risico dat je fiets wordt gestolen moet dalen van 10% in 2005 tot 6% in 2010). Ook wil het college meer controle gaan uitoefenen op de verkoop van gestolen fietsen door fietsenhandelaren.
Voor de uitvoering van de ambities uit het Meerjarenbeleidsplan Fiets 2007-2010 is een bedrag geraamd van in totaal 69,3 miljoen euro. Er wordt een bijdrage van de stadsdelen en de Stadsregio Amsterdam verwacht. Het Meerjarenbeleidsplan Fiets 2007-2010 gaat na de zomer naar de gemeenteraad.